兽皮症图片

试验研究

犬脓皮病病原菡的分离鉴寇与＝Ｕ－５鼓试验

许丹宁，刘容珍，曾艳

（仲恺农业工程学院生命科学学院，广东 广州 ５１０２２５）

中图分类号￥８５７．１１ ９ 文献标识码 Ａ 文章编号 １６７２—９６９２（２００９）０４—００２０—０３

［摘要］本试验对犬脓皮病致病菌进行分离鉴定，发现主要致病菌为金黄葡萄球

菌和表皮葡萄球菌，采用：１８种抗菌药物及７味中药进行体外药敏试验。结果显示：两

种致病菌对１８种抗菌药物中的头孢拉定、阿米卡星、环丙沙星等６种药物表现极敏，

对复方新诺明不敏感；７味中药中黄芩、黄连对两种致病菌均有较强的抑菌效果，平均

抑菌圈达到了１８．５ ｍｍ。本试验结果可为临床筛选高效低毒的药物提供理论依据。

［关键词］脓皮病；葡萄球菌；分离鉴定；中药；药敏试验

犬脓皮病即犬细菌性皮肤病，是由细菌感染 犬脓皮病的出现ｌｌ＿。犬脓皮病致病菌通常为化脓

引起的皮肤化脓性疾病，是兽医临床的常见皮肤 菌，如葡萄球菌、链球菌、化脓棒状杆菌、绿脓

病之一，多继发于真菌、螨虫及过敏性皮肤病， 杆菌等，细菌侵入毛囊、皮肤组织而形成化脓感

机体抵抗力降低、某些传染病等因素也可以导致 染，严重者可危及犬的生命Ｉ ２＿。本试验通过对犬

［收稿日期］２００９—０２—１５ 脓皮病病变部位进行病原菌的分离鉴定、体外药

、一

。

一 一 一

。 ，一

一 一 一 一 —｝ ，

一

， ，、一 ， 一

一 一

一 ， ， 一 一、 ２．２我国鸡肉及制品进出口压力增大。①进口方 平。我国的人均鸡肉消费量正在呈不断上升的趋

面，近期，巴西农业部长宣布，中国已经完全向巴 势，预计２００９年我国人均鸡肉消费量将突破１１

西开放了鸡肉市场。２００８年９月８日，国家质量 ｋｇ，消费潜力巨大，这将给肉鸡产量居全国第三的

监督检验检疫总局发布公告我国允许从加拿大进口 辽宁省肉鸡养殖业带来宝贵机遇。

禽类及其产品，国外鸡肉及制品的进入必然对我国 ３．２辽宁省积极扶持肉鸡产品加工企业走出国门。

国内鸡肉消费市场产生冲击。②出口方面，２００８ 截至２００８年７月，在辽宁省检验检疫局的大力帮

年５月８日，日本宣布增加对中国鸡肉及其加工品 扶下，辽宁地区对韩注册的禽肉加工企业已达１１

中硝基呋喃类的检测；之后，日本农林水产省修改 家，占全国出口韩国肉鸡产品数量的一半以上，有

了进口肉类的检查方法，加强对进口鸡肉和猪肉的 力拉动了辽宁省中西部地区肉鸡养殖业的扩大和发

检查。特别是对从中国、泰国等国进口的鸡肉制 展。

品，该省表示将根据疫情发生情况，提高检查比 ３．３食品安全监控力度加大，消费者对鸡肉及制

例，以确认这些制品是否被充分加热。近期，世界 品消费信心增大。２００９年２月２８目，第十一届全

各国纷纷拟定发布畜产品标签制度，即在产品包装 国人民代表大会常务委员会第七次会议通过《中华

上注明原产地等相关信息，促使本国消费者降低对 人民共和国食品安全法》。《食品安全法》明确了食品

进口产品的消费量，这些新的规定和制度将对我国 安全监管体制，建立了食品安全风险监测和评估制

鸡肉及制品的出口产生严重的消极影响。 度，明确了食品安全标准基本原则和食品生产经营

２．３ 生猪价格可能出现大幅下滑，一定程度拉低 质量安全规范，强化了食品检验工作，规范了食品

肉鸡价格。据相关部门专家预测，２００９年第二季 进出口的质量安全监管制度，建立了健全食品安全

度我国生猪价格有可能滑入谷底，在一定程度上将 事故处置机制，《食品安全法》的公布无疑使我国肉

拉低我国肉毛鸡价格。 类消费者对未来肉类食品安全充满了期待和信心。

３辽宁省肉鸡生产行业发展大有空间 总之，预计辽宁省肉鸡养殖业在２００９年全年

３．１ 我国鸡肉消费量稳步增长，消费潜力巨大。 生产效益不明显，肉鸡市场震荡起伏，但行业发展

以目前世界主要地区来说，美国的人均鸡肉消费量 大有空问。辽宁省的肉鸡养殖和畜禽加工企业要认

４３．６７ ｋｇ，加拿大人均鸡肉消费量３２．１４ ｋｇ，欧盟 清形势，抓住机遇，克服困难，紧跟政府决策方向

人均消费量１５．６ ｋｇ；同为发展中国家的巴西，人 和国内外形势，转变饲养方式，降低养殖成本，提

均消费量也达到３３－３ ｋｇ；台湾地区人均消费量也 升畜禽加工企业深加工能力和水平，进而不断加快

有２８ ｋｇ，这些都远远高于我国人均约ｌ０ 的水 辽宁省肉鸡养殖业持续、健康发展。

２００９ ４

试验研究

敏试验，探讨引起犬脓皮病的主要致病菌；应用

纸片法及打孔琼脂扩散法进行抗菌药及中药的体

外药敏试验，筛选出抑菌效果最好的药物，以期

为犬脓皮病临床用药提供科学依据。

１材料与方法

１．１ 材料

１．１．１ 病料采集 临床确诊原发性脓皮病病变

部位的脓性分泌物。

１．１．２抗菌药 氧哌嗪青霉素、氨苄青霉素、

羧苄青霉素、青霉素Ｇ、菌必治、头孢他啶、头

孢呋肟、头孢拉定、头孢噻肟、阿米卡星、庆大

霉素、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、

氟哌酸、复方新诺明、利福平。

１．１．３ 中药 金银花、黄芩、知母、板蓝根、

蒲公英、黄连、黄柏的单品水煎剂。

１．２方法

１．２．１ 细菌分离与培养对病变部位皮肤消毒，

揭开脓痂，用灭菌棉棒蘸取脓性分泌物，涂布于

普通琼脂培养皿上，３７ 恒温培养２４ ｈ。根据

菌落特征、革兰氏染特点及显微镜检查等初步

将致病菌分类，将挑选出的细菌做进一步纯培

养，镜检无杂菌者保存于试管斜面培养基内，按

有关生化试验方法进行鉴定。

１．２．２生化试验血浆凝固酶试验、尿素、七

叶苷、蔗糖、甘露醇、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、

硫化氢、三糖铁试验、过氧化氢酶试验。

１．２．３ 药敏试验①抗菌药采用药物纸片琼脂

扩散法，取３７℃培养２４ ｈ菌落５个，稀释后平

铺于营养琼脂平皿表面，稍干燥，贴上药敏纸

片，３７℃恒温培养２４ ｈ后取出，测量抑菌圈的

直径，判定标准见表１。②中药采用打孔琼脂扩

散法，上述稀释菌液均匀平铺于营养琼脂平皿表

面，稍干燥，用直径６ ｍｍ琼脂打孔器均匀打

孔，将中药煎剂加入孔中，刚好平于孔面为宜，

置４℃作用１ ｈ后取出，３７℃恒温培养２４ ｈ后

取出观察结果。

表１ 药敏试验判定标准

抑菌圈直径（ｍｍ） 极敏 高敏 中敏 低敏

敏感度 ／＞２０ １５～２０ １０ １４ ≤１０

２试验结果

２．１ 细菌分离鉴定结果通过初步的细菌分离

试验结合显微镜下检查发现，病原菌全部为革兰

２００９ ４

氏染阳性的球菌，菌落颜稍有不同。生化试

验结果发现，病原菌分别为金黄葡萄球菌和表

皮葡萄球菌。

２．２药敏试验结果

２．２．１抗菌药药敏试验结果表皮葡萄球菌对

１８种抗菌药中的１４种均表现极敏（７７．７８％），金

黄葡萄球菌对其中的７种表现极敏（３８．８９％），

两种致病菌对羧苄青霉素、菌必治、头孢拉定、

头孢噻肟、阿米卡星、环丙沙星均表现极敏，对

复方新诺明不敏感，具体结果见表２。

表２抗菌药药敏试验结果

抗菌药 表皮葡萄球菌金黄葡萄球菌。 抗菌药 表皮葡萄球菌金黄葡萄球菌

氧哌嗪青霉素 料 头孢呋肟 料 一

氮苄青霉素 料 头孢拉定 料 ｝料

羧苄青霉素 料 料 头孢噻肟 ｛料 料｛

青霉素Ｇ 料 ｛ ５可米卡星 ￥ ｝料

菌必治 料｝ 料 庆大霉素 貅 料

头孢他啶 一 四环素 料 料

红霉素 料 料｝ 氟哌酸 料｝

万古霉素 复方新诺明 一 一

环丙沙星 梅｝ 料 利福平 料 ｝

注：“爿ｃ料”为极敏；“木水”为高敏；“爿ｃ”为中敏；“一”为

低敏。

２．２．２ 中药药敏试验结果 ７种检测中药中，

黄芩和黄连对两种致病菌均表现较强的抑制作

用，平均抑菌圈直径达到了１８．５ ｍｍ，金银花的

平均抑菌圈直径为１４．５ ｍｍ，而知母、板蓝根、

蒲公英无抑菌效果，具体结果见表３。

表３中药药敏试验结果 ｍｍ

注：“一”为抑菌圈直径太小无测量意义或无抑菌

圈。

３讨论

３．１ 犬脓皮病病源 犬脓皮病是犬临床的常见

病之一，发病率高、病程长、复杂，通常继

发于其他类型的皮肤病，因此容易忽视，造成更

严重的全身感染，甚至并发败血症危及犬的生

命。本试验从患病犬病变部位脓性分泌物中分离

试验研究

出两种主要致病菌，均为葡萄球菌，说明葡萄球

菌还是目前造成犬脓皮病的主要致病菌种，这与

薛占永等报道一致【３１。葡萄球菌属于条件性致病

菌，广泛存在于周围环境及人和动物的皮肤及黏

膜，当有利于其繁殖的因素出现时，即会侵害犬

的皮肤造成化脓感染，这就需要平时做好预防工

作。当犬的皮肤发生病变时，要考虑到继发脓皮

病的可能性，避免感染扩散造成严重的后果。

３．２ 中西药药敏试验 ｌ８种抗菌药物均选用临

床葡萄球菌感染的常用药物，表皮葡萄球菌

对其中１５种药物表现高敏及极敏（８３．３４％），不

敏感的药物只有～种（５．５６％），说明大部分药物

对表皮葡萄球菌的抑菌效果较好，这与沈伟的

报告略有不同【４】，可能因为目前兽医临床分离出

的表皮葡萄球菌还没有明显的耐药性。金黄葡萄

球菌对其中１ １种药物表现高敏及极敏（６１．１１％），

不敏感的药物有３种（１６．６７％），包括头孢他啶、

头孢呋肟及复方新诺明，可能与临床上使用频率

较高，造成菌株的耐药性增强有关。在两种致病

菌共同敏感的药物中有３种为头孢类抗生素，说

明目前头孢类药物仍是抑制葡萄球菌的有效药

物，但使用时应注意药量及给药时间，避免造成

更多耐药菌株出现。在用药时，应根据现有

条件，避开不敏感药物，选择敏感性高的抗生

素，并交叉用药，提高治愈率。

选用的７味中药单品，均是对葡萄球菌抑菌

及杀菌作用比较突出的临床常用中药。从药敏试

验结果看，黄芩和黄柏的抑菌效果最好，金银花

也表现出较明显的抗菌作用，黄柏只对金黄葡萄

球菌有抑制作用，且抑菌圈仅为１０ ｍｍ，作用较

弱，知母、板蓝根和蒲公英不表现抑菌作用。目

前国内对于中药药敏试验的抑菌效果判定还没有

一个规范的标准，只能根据抑菌圈的大小进行比

较，抑菌圈越大说明抑菌效果越好。本试验得出

的最大抑菌圈为２０ ｍｍ，已达到了抗生素药敏试

验判定标准中的极敏，说明黄连的抑菌功能最

强，此外黄芩、金银花对引起犬脓皮病的葡萄球

菌的抑制作用也非常明显，可以尝试在临床上应

用单品水煎剂做药浴，直接作用到病变部位起到

抗菌、杀菌的作用。

目前犬脓皮病主要依靠化学抗菌药物，

由于临床不适当的使用抗生素，造成效果

差、耐药菌株不断增多，而且长期全身用药还会

造成犬抵抗力下降，更不利于疾病的好转。采用

局部和全身、中西药结合的方法会起到很好

的效果，局部用药可达到直接作用病变部位、减

少毒副作用的目的ｌ ５ｌ。选用抑菌效果确实的中药

煎剂定期对犬皮肤进行药浴和涂擦，结合抗生素给

药，不仅可以减少抗生素的用量、防止耐药菌株的

出现，还可以直接使中药作用于病变部位，起到抗

菌的功效，安全性大，不易中毒，对机体的损害减

到最小，从而达到安全、快速的目的。

［参考文献］

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２００９．４